二氧化碳摇床的消毒步骤

二氧化碳摇床（CO₂培养箱）的消毒是确保细胞培养环境无菌的关键步骤。以下是详细的消毒步骤和注意事项：


一、消毒前准备
1. 关闭设备
  断开电源，关闭CO₂气源。
  取出培养箱内的所有培养物、隔板、水盘等可拆卸部件。
2. 清洁表面污渍
  用中性洗涤剂或70%乙醇擦拭内壁、门封和外部，去除可见污垢。
  顽固污渍可用无菌蒸馏水或温和去垢剂处理，避免腐蚀性清洁剂。

二、消毒方法
# 1. 湿热灭菌（高压蒸汽）
  适用部件：可拆卸的隔板、水盘、支架等耐高温部件。
  步骤：
1. 121℃高压灭菌15 20分钟。
2. *底干燥后再放回培养箱。
#2. 化学消毒
  常用消毒剂：
  70%乙醇：擦拭内壁，作用5 10分钟。
  过氧化氢（3 6%）：喷洒或擦拭，静置30分钟后用无菌水擦净。
  季铵盐类（如苯扎氯铵）：按说明书稀释使用。
  步骤：
1. 喷洒或擦拭消毒剂，确保覆盖所有角落。
2. 作用时间结束后，用无菌蒸馏水*底清除残留。
# 3. 紫外线（UV）照射
  使用培养箱自带的UV灯（若无则需外置UV灯）。
  照射时间：30分钟至1小时（注意避开橡胶/塑料部件）。
  注意：UV穿透力有限，需配合其他消毒方式。
# 4. 高温干热灭菌（部分型号支持）
  设定140℃维持2小时（需确认设备耐受性）。
  仅适用于无塑料/橡胶部件的空腔。

三、消毒后处理
1. 重新组装
  安装已灭菌的隔板、水盘（加入无菌水保持湿度）。
  检查门封是否密封。
2. 预平衡环境
  开启CO₂和温度至设定值（如37℃、5% CO₂），稳定24小时后再使用。
  可放置无菌PBS或培养基测试无菌性。
3. 验证消毒效果
  使用生物指示剂（如孢子试条）或定期微生物检测。

四、注意事项
  个人防护：戴手套、口罩，避免消毒剂接触皮肤。
  消毒剂选择：避免含氯或强氧化剂腐蚀不锈钢内胆。
  频率建议：
  常规消毒：每1 2个月一次。
  污染后：立即*底消毒。
  记录：记录消毒日期、方法和责任人。


五、常见问题
  霉菌污染：可先用5%碳酸氢钠擦拭，再消毒。
  顽固生物膜：使用酶清洁剂预处理。
  气味残留：延长通风时间或使用活性炭吸附。
通过规范操作和定期维护，可有效降低污染风险，确保细胞培养的可靠性。